《中國藥典》2020年版第一增補本 “2351真菌毒素測定法”變動部分梳理及應對方案
2023年10月18日，國家藥典委員會發(fā)布公告，《中國藥典》2020年版第一增補本已編制完成，將于明年3月12日正式實施。島津技術(shù)團隊緊跟法規(guī)變化，梳理相關標準變動部分，并為廣大客戶提供應對方案。
“2351真菌毒素測定法”變動部分梳理
一、黃曲霉毒素測定法：第一法（液相色譜法）
1、混合對照品溶液的制備
精密量取貯備溶液1ml，置25ml量瓶中，用“70%（訂正）”甲醇稀釋至刻度，即得。
對照品溶液制備時定容溶劑為純甲醇，洗脫能力大于分離條件洗脫能力，在某些基質(zhì)中峰形可能較差，修改為70%甲醇后，洗脫能力與分離條件洗脫能力接近，改善某些基質(zhì)中峰形。
2、供試品溶液的制備
再用“1.5mL（訂正）”甲醇洗脫，收集洗脫液，置2ml量瓶中，加“水（訂正）”稀釋至刻度。
明確了甲醇洗脫液的體積，洗脫體積不夠，抗體中結(jié)合的黃曲霉毒素不能完全被洗脫掉，會導致檢測偏差較大。
三、玉米赤霉烯酮測定法：第一法（液相色譜法）
1、色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗
以熒光檢測器檢測，激發(fā)波長λex=232nm“（或274nm）訂正”，發(fā)射波長λem=460nm。
在標準實施階段，我們發(fā)現(xiàn)在不同品牌熒光檢測器上，不同激發(fā)波長的基線噪音有差異，需要根據(jù)實際情況選擇合適的激發(fā)波長。
六、多種真菌毒素測定法
1、以三重四極桿質(zhì)譜儀檢測
電噴霧離子源（ESI），黃曲霉毒素G2、G1、B2、B1、伏馬毒素B1、B2及T-2毒素“及嘔吐毒素”為正離子采集模式，赭曲霉毒素A、玉米赤霉烯酮為負離子采集模式（修訂）。
“嘔吐毒素檢出限35μg/kg，定量限100μg/kg”（訂正）。
“赭曲霉毒素A檢出限1μg/kg，定量限2μg/kg”（訂正）。
注：以上順序為方法原文的順序。
玉米赤霉烯酮應用方案
儀器配置：島津高效液相色譜儀RF-20A
色譜柱：ShimNex CS C18，250mm×4.6mm，5μm (P/N：380-01230-01)
流速：1.0 mL/min；
進樣量：5 μL-50 μL；
柱溫：30℃；
流動相：乙腈-水=50：50
檢測器：熒光檢測器；激發(fā)波長274nm，發(fā)射波長460nm
玉米赤霉烯酮標準溶液色譜圖（進樣量：5 μL）
儀器配置：島津高效液相色譜儀RF-20Axs
色 譜 柱 ：Shim-pack GIST C18 ，4.6 mm I.D.×250 mm L.，5.0 μm， PN：227-30017-08
流 動 相 ：乙腈-水（50：50）
流 速 ：1.0 mL/min
柱 溫 ：30℃
檢測波長 ：激發(fā)波長232 nm，發(fā)射波長460 nm
玉米赤霉烯酮標準溶液色譜圖（進樣量：5 μL）
從兩張色譜圖結(jié)果可以看到，使用激發(fā)波長274nm條件下，基線噪音良好，響應滿足檢測技術(shù)指標要求。
多種真菌毒素測定法應用案例
10種真菌毒素薏苡仁基質(zhì)標準溶液的MRM圖譜
薏苡仁樣品檢測結(jié)果
對“薏苡仁”樣品進行檢測，發(fā)現(xiàn)四種真菌毒素有檢出，分別是DON（嘔吐毒素）、FB1（伏馬毒素B1）、FB2（伏馬毒素B2）、ZON（玉米赤霉烯酮）。其中“薏苡仁”在藥典正文規(guī)定中需要檢測黃曲霉毒素和玉米赤霉烯酮，樣品檢測結(jié)果滿足藥典要求。
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