科學(xué)家成功解析新冠病毒主蛋白酶三維結(jié)構(gòu)
由上海科技大學(xué)饒子和/楊海濤團隊與合作者組成的“抗新冠病毒攻關(guān)聯(lián)盟”，率先在國際上成功解析新型冠狀病毒關(guān)鍵藥物靶點——主蛋白酶（Mpro）的高分辨率三維空間結(jié)構(gòu)，并綜合利用3種不同的藥物發(fā)現(xiàn)策略，找到針對新冠病毒的潛在藥物。
北京時間4月9日下午5點，經(jīng)《自然》雜志邀請投稿，上述團隊在該期刊上聯(lián)合發(fā)表了這一最新成果。其中，上海科技大學(xué)為論文第一完成單位。
（左）新冠病毒主蛋白酶-抑制劑N3的復(fù)合物結(jié)構(gòu)；（右）冠狀病毒主蛋白酶的底物結(jié)合口袋是一個保守藥物設(shè)計靶點
截至4月8日，全球累計確診新冠肺炎約150萬人，死亡人數(shù)超過8.7萬人，已覆蓋全球200多個國家和地區(qū)。
新型冠狀病毒與嚴(yán)重急性呼吸道綜合征冠狀病毒（SARS-CoV）和中東呼吸綜合征冠狀病毒（MERS-CoV）具有較近的親緣關(guān)系，因缺乏特效藥和疫苗，針對新型冠狀病毒的藥物靶點科研攻關(guān)及新藥研發(fā)迫在眉睫。
新型冠狀病毒非常“狡猾”，在入侵細(xì)胞后，會立即利用細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)合成自身復(fù)制必需的兩條超長復(fù)制酶多肽（pp1a和pp1ab）。
這兩條復(fù)制酶多肽需要被剪切成多個零件（如RNA依賴的RNA聚合酶、解旋酶等等）；這些零件進(jìn)一步組裝成一臺龐大的復(fù)制轉(zhuǎn)錄機器，然后病毒才能啟動自身遺傳物質(zhì)的大量復(fù)制。兩條復(fù)制酶多肽的剪切要求異常精確，因此病毒自身編碼了一把神奇的“魔剪”——主蛋白酶（Mpro）。
這把“魔剪”在復(fù)制酶多肽上存在至少11個切割位點，只有當(dāng)這些位點被正常切割后，這些病毒復(fù)制相關(guān)的“零件”才能順利組裝成復(fù)制轉(zhuǎn)錄機器，啟動病毒的復(fù)制。
由于主蛋白酶這把“魔剪”在病毒復(fù)制過程中起到至關(guān)重要的作用，且人體中并無類似的蛋白質(zhì)，因此主蛋白酶就成為一個抗新冠病毒的關(guān)鍵藥靶。
雖然過去30年間至少出現(xiàn)了30種新發(fā)傳染病（如SARS、 MERS等），如何能在疫情期間迅速找到具有臨床潛力的藥物仍然是一個重大挑戰(zhàn)。
為解決這一難題，攻關(guān)“聯(lián)盟”首先瞄準(zhǔn)了“老藥”，即成藥、臨床試驗藥物以及天然產(chǎn)物；同時開展了從頭設(shè)計、計算機虛擬篩選和高通量篩選3種不同的研究策略，三管齊下。
在從頭設(shè)計的研究策略中，攻關(guān)“聯(lián)盟”發(fā)現(xiàn)邁克爾受體N3是一個主蛋白酶的強效抑制劑，并率先解析了2.1?的“主蛋白酶-N3”的高分辨率復(fù)合物結(jié)構(gòu)（隨后又提高至1.7?），這也是世界上第一個被解析的新冠病毒蛋白質(zhì)的三維空間結(jié)構(gòu)。
為方便相關(guān)的科技工作者第一時間開發(fā)以該酶為靶點的抗病毒藥物，攻關(guān)“聯(lián)盟”第一時間公開了研究成果，并在PDB蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫（Protein Data Bank, PDB）公開了結(jié)構(gòu)坐標(biāo)。
自1月26日起，團隊已為國內(nèi)外300多家高校、研究機構(gòu)及企業(yè)的實驗室直接提供了數(shù)據(jù)。該結(jié)構(gòu)被PDB蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫選為2020年2月的明星分子（February Molecule of the Month），并被PDB撰文報道。
此后，攻關(guān)“聯(lián)盟”繼續(xù)聯(lián)合利用虛擬篩選和高通量篩選策略相結(jié)合的方式，對10000多個老藥、臨床藥物以及天然活性產(chǎn)物進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)了數(shù)種對主蛋白酶有顯著抑制作用的藥物，其中包括雙硫侖（disulfiram）、卡莫氟（carmofur）、依布硒（ebselen）、紫草素（shikonin）、Tideglusib和PX-12等。
后續(xù)的抗新冠病毒實驗顯示，依布硒和N3均能在細(xì)胞水平顯著抑制新冠病毒的復(fù)制。值得一提的是，依布硒已用于治療聽力障礙等多種疾病的臨床試驗（完成臨床二期），并具有很好的安全性表現(xiàn)。上述研究成果，為迅速開發(fā)具有臨床潛力的抗新冠肺炎的先導(dǎo)藥物奠定了重要基礎(chǔ)。
“抗新冠病毒攻關(guān)聯(lián)盟”由上海科技大學(xué)-清華大學(xué)饒子和/楊海濤團隊、中科院上海藥物所蔣華良團隊、軍事科學(xué)院軍事醫(yī)學(xué)研究院秦成峰團隊以及中科院武漢病毒所石正麗團隊、肖庚富團隊等組成。國家蛋白質(zhì)科學(xué)中心（上海）主任兼上海科技大學(xué)生命科學(xué)與技術(shù)學(xué)院教授許文青、澳大利亞昆士蘭大學(xué)教授Luke W. Guddat參與了此項研究。
攻關(guān)“聯(lián)盟”中的饒子和院士團隊自從2003年SARS暴發(fā)以來，在17年間一直致力于冠狀病毒關(guān)鍵藥靶的研究及抗病毒新藥的研發(fā)。
研究團隊在SARS暴發(fā)期間，就曾在世界上解析了首個SARS病毒蛋白質(zhì)（主要蛋白酶）的三維空間結(jié)構(gòu)，為抗SARS藥物的研發(fā)提供了關(guān)鍵結(jié)構(gòu)依據(jù)；隨后研究團隊又設(shè)計和開發(fā)出首個抑制所有冠狀病毒的廣譜抑制劑。這些前期的研究都為最新研究的順利開展奠定了基礎(chǔ)。
相關(guān)論文信息：https://www.nature.com/articles/s41586-020-2223-y
