抗體檢測最快3分鐘出結果！核酸檢測遭遇“替代危機”？
近日，多個科研團隊對外宣稱已成功研發(fā)抗體試劑盒，最快3分鐘就能得知新型冠狀病毒檢測結果，有些產(chǎn)品也進入國家藥品監(jiān)督管理局審批程序。
這種新的檢測方法是否能替代已有的核酸檢測？不同方法有何區(qū)別？距進入臨床使用還有多遠？
中華醫(yī)學會檢驗醫(yī)學分會主任委員王成彬表示：“抗體檢測盡管有便捷、快速的優(yōu)勢，但目前還不可能替代核酸檢測。如何將病毒抗體（抗原）檢測方法與病毒核酸檢測方法聯(lián)合應用，發(fā)揮各自優(yōu)勢，急需進行評價和驗證。”
河南農(nóng)業(yè)大學校長、中國工程院院士張改平也就上述問題接受了采訪。
《中國科學報》：目前針對新型冠狀病毒，主要的試劑檢測辦法有哪些？
王成彬：目前針對新型冠狀病毒檢測試劑分成兩類，一類是對病毒的直接檢測，一類是間接檢測。
直接檢測就是目前實驗室廣泛應用的針對病毒的核酸檢測，檢測新型冠狀病毒基因中某些特定核酸序列的存在，是目前公認的新型冠狀病毒肺炎實驗室診斷金標準方法。
間接檢測試劑分為針對病毒抗體檢測和針對病毒抗原的檢測。抗體檢測試劑是檢測血清中由病毒進入人體后刺激人體產(chǎn)生的IgM或IgG抗體，IgM抗體出現(xiàn)較早，IgG抗體出現(xiàn)較晚。病毒抗原檢測主要是檢測病毒表面的一些蛋白質(zhì)。
《中國科學報》：目前發(fā)布的抗體檢測試劑盒迅速高效，它會替代核酸檢測試劑嗎？
張改平：抗體檢測，尤其適用于大量疑似病例的檢測，無癥狀感染者也可用。
這個在將來也大有用處，我們可以用在人的流行病學篩選調(diào)查，比如調(diào)查1萬人，通過抗體檢測，到底有多少人感染過這個病毒而沒有癥狀，就能得出數(shù)據(jù)了。
而快速檢測全病毒抗原現(xiàn)在是不太可能的，還得等一等。因為抗原檢測通常需要更高的敏感性，通常樣品中含量很低，而這個新型冠狀病毒剛出來，認識抗原、跟蹤抗體的研究都需要一定的時間，針對病毒的單克隆抗體等研制也需要時間。
王成彬：衛(wèi)健委發(fā)布的《新型冠狀病毒感染的肺炎診療方案(試行第六版)》中，實驗室確診病例的依據(jù)還是核酸檢測陽性，也增加了基因測序，還沒有提及其他的檢測方法。抗體檢測是間接檢測方法，盡管有便捷、快速的優(yōu)勢，但與核酸檢測比較有其應用的局限性，目前還不可能替代核酸檢測。
如何將間接的病毒抗體（抗原）檢測方法與直接的病毒核酸檢測方法聯(lián)合應用，發(fā)揮各自優(yōu)勢，急需要進行評價和驗證，據(jù)我了解相關部門已開始啟動該項工作。
《中國科學報》：近日，麻省理工學院稱其開發(fā)的核酸檢測系統(tǒng)繞開PCR擴增、采用等溫擴增技術RPA，有望一小時內(nèi)實現(xiàn)病毒檢測。
那么目前國內(nèi)核酸檢測技術與應用有哪些前沿技術開發(fā)，還有哪些難點需要克服？
王成彬：現(xiàn)在反映的核酸檢測“假陰性”問題主要是用核酸檢測確診患者假陰性的問題，而不是核酸檢測本身假陰性的問題。
至于等溫擴增技術，這是個很好核酸檢測方法，它的特點也是對核酸分子進行擴增檢測，但不需要在不同溫度間的變化環(huán)節(jié)，因此靈敏度高、簡便快速、成本低。
但是目前由于不太好解決的易形成非特異擴增造成“假陽性”結果等問題，還沒有在臨床實驗室廣泛應用，需要繼續(xù)進行改進。
近期，也有一些專家推薦更靈敏的數(shù)字PCR方法、可以檢測更多病毒基因位點的RT-PCR毛細管電泳方法、高通量檢測的核酸質(zhì)譜方法、更可靠的基因測序方法，但是這些先進的前沿檢測技術存在三個問題：
一是時間太長，其它方法有些要用10個小時以上，甚至于24個小時或更長時間；
第二，實驗室常規(guī)檢驗中大多數(shù)用的是實時熒光RT-PCR方法，如果換成新的，實驗室還得重新買設備、人員重新培訓，成本太高；
第三，檢測過程相對復雜，對檢測人員素質(zhì)要求高，檢測質(zhì)量不易控制。因此，以后如何對前沿檢測技術進行簡便易用的改良并在臨床檢測中廣泛應用有必要成為關注重點。
《中國科學報》：據(jù)國務院聯(lián)防聯(lián)控機制新聞發(fā)布會消息，目前已有七個診斷檢測試劑獲批上市。在實際工作中，是否有一個行業(yè)標準去評價新型冠狀病毒檢測試劑的質(zhì)量？
王成彬：任何檢測試劑獲準上市之前都要經(jīng)過一系列嚴格的實驗室質(zhì)量評價和臨床應用評價，這些評價肯定是要有評價標準的，而且大多數(shù)產(chǎn)品在進入臨床實驗室實際應用前，至少還要做臨床患者的標本檢測的性能驗證。
目前臨床實驗室所開展的檢測項目，國家和地方臨檢中心會定期對各個實驗室之間的檢測質(zhì)量進行評價。
但由于本次疫情的特殊性，時間的緊迫性，很多廠家所研發(fā)試劑來不及完成正常流程，特別是無法得到一定數(shù)量臨床患者標本的驗證，有些廠家只能用新型冠狀病毒目標RNA序列通過噬菌體蛋白外殼包裹等方式模擬真實標本中的病毒進行驗證。
目前有超過130多家廠家在生產(chǎn)新型冠狀病毒相關檢測試劑，質(zhì)量上的參差不齊在所難免。
但也并不說如此多廠家之間可能存在質(zhì)量上的參差不齊，就一定意味著目前實驗檢測結果不可靠，因為實驗室選購哪一家試劑應用，都會進行慎重評估和選擇。
張改平：國家批準商業(yè)化試劑時需要復雜的鑒定過程，只有企業(yè)才能申請生產(chǎn)。
實際上，大家都容易被誤導，很多人講10分鐘、3分鐘出結果，但實際上對于基因檢測這么短時間是不行的。
現(xiàn)在醫(yī)院大部分用的都是試紙檢測加實時熒光PCR檢測，但是整個檢測過程還包括采樣、處理樣本等等許多步驟，總時間是大于2小時左右。
此外，對于試紙來說，3分鐘、5分鐘差別并不大，主要是試紙材料的改進。
比如，試紙上的層析膜會固定不同生物活性材料從而形成“檢測線”，膜的孔徑一般是微米級的，要提高精度和敏感性，需要把孔徑縮小，使待檢樣品溶液流的慢些；要提高速度，需把孔徑放大，使待檢樣品溶液流的快些。
當然還有其他方面，比如標記的密度、抗體的親和力等。
《中國科學報》：您認為此次抗擊疫情過程中，我們在檢測試劑研發(fā)方面能收獲哪些經(jīng)驗和啟示？
張改平：快速檢測技術需要長期積累和技術積淀，而我們正是得益于在試紙快速檢測方面有著長達20十余年的原始創(chuàng)新積累和技術儲備，在國內(nèi)率先建立了抗原、抗體及小分子半抗原三大快速檢測技術體系，才能在此次疫情防控中快速制備出臨床所需要的快速檢測試紙，為國家和社會貢獻應有之力。
